Dados do Curso

Justificativa
A resistência a inseticidas representa um dos principais desafios para o controle vetorial de arboviroses nas Américas. O mosquito Aedes aegypti, vetor de dengue, Zika e chikungunya, vem apresentando níveis crescentes de resistência a diferentes classes de inseticidas, comprometendo a efetividade das ações de controle. O monitoramento sistemático dessa resistência é, portanto, essencial para a formulação de políticas públicas eficazes e sustentáveis.

Os bioensaios são o método de referência para avaliar a susceptibilidade dos vetores, porém não permitem identificar diretamente os mecanismos moleculares envolvidos. A vigilância molecular, por sua vez, é uma ferramenta complementar e estratégica, pois possibilita detectar mutações em genes-alvo, como as mutações kdr (knockdown resistance) no canal de sódio regulado por voltagem, e alterações na expressão de genes relacionados à resistência metabólica (P450s, GSTs, COEs). A integração entre abordagens fenotípicas e moleculares amplia a compreensão sobre os processos seletivos em curso e subsidia estratégias de manejo da resistência.

A WINSA, uma rede de promoção ao conhecimento técnico-científico sobre resistência a inseticidas e de inovação em métodos de vigilância e controle de vetores. De iniciativa multinacional, reúne grupos de pesquisa de instituições científicas da América do Sul e parceiros de outros continentes. A rede busca fortalecer a capacidade regional de pesquisa e vigilância da resistência a inseticidas e de estratégias de controle de vetores, promovendo colaborações técnico-científicas, intercâmbio de pesquisadores, capacitação de recursos humanos, desenvolvimento de ferramentas e padronização de metodologias, entre outras ações. A promoção de workshops e treinamentos integrados constitui uma das estratégias centrais da WINSA para consolidar competências regionais e harmonizar práticas laboratoriais.

Objetivo Geral
O curso pretende harmonizar metodologias de ensaios moleculares voltadas à avaliação de mecanismos conhecidos de resistência a inseticidas em populações de Aedes aegypti das Américas.

Objetivos Educacionais/Aprendizagem
Os estudantes devem ser capazes de desenvolver os métodos:
> Extração, purificação, dosagem e diluição de ácidos nucleicos (DNA e RNA);• Genotipagem de mutações kdr por qPCR (TaqMan SNP);
> Análise da expressão de genes associados à resistência metabólica, por RT-PCR;
> Tratamento, interpretação e integração dos dados moleculares com informações provenientes de bioensaios e vigilância entomológica.

Metodologia
O curso combina aulas teóricas e atividades práticas em laboratório, contemplando:
> Fundamentos teóricos da resistência a inseticidas e seus mecanismos moleculares;
> Protocolos diversificados de extração e purificação de DNA e RNA;
> Quantificação e diluição de ácidos nucleicos;
> Ensaios de genotipagem de mutações kdr e expressão gênica diferencial por qPCR;
> Controle de qualidade, reprodutibilidade e análise comparativa de dados entre laboratórios.
> Cada aluno irá trabalhar com mosquitos Aedes aegypti de uma linhagem mantida no LBCVIV com genotipos kdr previamente conhecidos

Avaliação
Os alunos apresentarão para a turma os resultados gerados a partir das amostras com que trabalhou e juntos farão a redação de um documento em formato de nota técnica às autoridades e de um artigo científico